Tujuan dan Langkah Terlibat dalam Ujian Karyotaip

Sekiranya doktor anda telah mengesyorkan ujian kariotip untuk anda atau anak anda, atau setelah amniosentesis, apakah ujian ini? Keadaan apa yang dapat didiagnosis kariotip, apakah langkah-langkah yang diperlukan untuk melakukan ujian, dan apa batasannya?

Apa itu Ujian Karyotaip?

Kariotip adalah gambar kromosom dalam sel. Karyotip boleh diambil dari sel darah, sel kulit janin (dari cairan ketuban atau plasenta), atau sel sumsum tulang.

Keadaan Diagnosis Dengan Ujian Karyotaip

Karyotip boleh digunakan untuk memeriksa dan mengesahkan kelainan kromosom seperti sindrom Down dan sindrom Cat Eye, dan terdapat beberapa jenis kelainan yang dapat dikesan.

Keabnormalan kromosom:

• Trisomi di mana terdapat tiga salinan salah satu kromosom daripada dua
• Monosom yang terdapat hanya satu salinan (bukannya dua)
• Penghapusan kromosom di mana bahagian kromosom hilang
• Translokasi kromosom di mana bahagian satu kromosom melekat pada kromosom yang lain (dan sebaliknya dalam translokasi seimbang.)

Contoh trisomi merangkumi:

• Sindrom Down (trisomi 21)
• Sindrom Edward (trisomi 18)
• Sindrom Patau (trisomi 13)
• Sindrom Klinefelter (XXY dan variasi lain) - Sindrom Klinefelter berlaku pada 1 dari 500 lelaki yang baru lahir
• Sindrom Triple X (XXX)

Contoh monosomi merangkumi:

• Sindrom Turner (X0) atau monosomi X - Kira-kira 10% keguguran trimester pertama disebabkan oleh sindrom Turner, tetapi monosomi ini hanya terdapat pada sekitar 1 dari 2,500 kelahiran wanita hidup

Contoh penghapusan kromosom termasuk:

• Sindrom Cri-du-Chat (kromosom 5 hilang)
• Sindrom Williams (kromosom 7 hilang)

Translokasi - Terdapat banyak contoh translokasi termasuk sindrom Down translokasi. Translokasi Robertsonian adalah perkara biasa, berlaku pada kira-kira 1 dari 1000 orang.

Mosaicism adalah keadaan di mana beberapa sel di dalam badan mempunyai kelainan kromosom sementara yang lain tidak. Sebagai contoh, sindrom mosaik Down atau trisomi mosaik 9. Trisomi penuh 9 tidak sesuai dengan kehidupan, tetapi trisomi mosaik 9 boleh mengakibatkan kelahiran hidup.

Bila Selesai

Terdapat banyak keadaan di mana kariotip mungkin disyorkan oleh doktor anda. Ini mungkin termasuk:

• Bayi atau kanak-kanak yang mempunyai keadaan perubatan yang menunjukkan kelainan kromosom yang belum didiagnosis.
• Orang dewasa yang mempunyai gejala yang menunjukkan adanya kelainan kromosom (contohnya, lelaki dengan penyakit Klinefelter mungkin tidak didiagnosis sehingga baligh atau dewasa.) Sebilangan gangguan trisomi mosaik juga mungkin tidak didiagnosis.
• Kemandulan: Kariotip genetik mungkin dilakukan untuk kemandulan. Seperti yang dinyatakan di atas, beberapa kelainan kromosom mungkin tidak didiagnosis sehingga dewasa. Seorang wanita dengan sindrom Turner atau lelaki dengan salah satu varian Klinefelter's mungkin tidak menyedari keadaannya sehingga mereka mengatasi kemandulan.
• Ujian pranatal: Dalam beberapa kes, seperti sindrom Down translokasi, keadaannya mungkin turun-temurun dan ibu bapa mungkin diuji jika seorang anak telah dilahirkan dengan sindrom Down. (Penting untuk diperhatikan bahawa kebanyakan sindrom Down bukan gangguan keturunan melainkan mutasi kebetulan.)
• Kelahiran Masih: Kariotip sering dilakukan sebagai sebahagian daripada ujian selepas kelahiran mati.
• Keguguran berulang: Kariotip ibu bapa keguguran berulang boleh memberi petunjuk mengenai sebab-sebab kerugian berulang yang dahsyat ini. Dianggap bahawa kelainan kromosom, seperti trisomi 16, adalah penyebab sekurang-kurangnya 50% keguguran.
• Leukemia: Ujian karyotaip juga dapat dilakukan untuk membantu mendiagnosis leukemia, misalnya, dengan mencari kromosom Philadelphia yang terdapat pada beberapa orang dengan leukemia myelogenous kronik atau leukemia limfositik akut.

Langkah Terlibat

Ujian kariotip mungkin terdengar seperti ujian darah sederhana, yang membuat banyak orang bertanya-tanya mengapa memerlukan begitu lama untuk mendapatkan hasilnya. Ujian ini sebenarnya agak rumit selepas pengumpulan. Mari lihat langkah-langkah ini supaya anda dapat memahami apa yang berlaku semasa anda menunggu ujian.

1. Koleksi Contoh

Langkah pertama dalam melakukan kariotip adalah mengumpulkan sampel. Pada bayi baru lahir, sampel darah yang mengandungi sel darah merah, sel darah putih, serum, dan cecair lain dikumpulkan. Kariotip akan dilakukan pada sel darah putih yang secara aktif membelah (keadaan yang dikenali sebagai mitosis). Semasa kehamilan, sampel boleh berupa cecair amniotik yang dikumpulkan semasa amniosentesis atau sekeping plasenta yang dikumpulkan semasa ujian persampelan chorionic villi (CVS). Cecair ketuban mengandungi sel-sel kulit janin yang digunakan untuk menghasilkan kariotip.

2. Pengangkutan ke Makmal

Karyotypes dilakukan di makmal tertentu yang disebut makmal sitogenetik - makmal yang mengkaji kromosom. Tidak semua hospital mempunyai makmal sitogenetik. Sekiranya hospital atau kemudahan perubatan anda tidak mempunyai makmal sitogenetik sendiri, sampel ujian akan dihantar ke makmal yang pakar dalam analisis kariotip. Sampel ujian dianalisis oleh pakar teknologi sitogenetik terlatih, Ph.D. cytogeneticists, atau ahli genetik perubatan.

3. Mengasingkan Sel

Untuk menganalisis kromosom, sampel mesti mengandungi sel yang secara aktif membelah. Dalam darah, sel darah putih secara aktif membelah. Sebilangan besar sel janin juga aktif membelah. Setelah sampel sampai ke makmal sitogenetik, sel-sel yang tidak membahagi dipisahkan dari sel pembahagi menggunakan bahan kimia khas.

4. Membesar Sel

Untuk mempunyai sel yang cukup untuk dianalisis, sel pemisah ditanam dalam media khas atau kultur sel. Media ini mengandungi bahan kimia dan hormon yang membolehkan sel membelah dan membiak. Proses kultur ini memerlukan tiga hingga empat hari untuk sel darah, dan hingga seminggu untuk sel janin.

5. Menyelaraskan Sel

Kromosom adalah rentetan DNA manusia yang panjang. Untuk melihat kromosom di bawah mikroskop, kromosom harus dalam bentuk yang paling padat dalam fasa pembelahan sel (mitosis) yang dikenal sebagai metafase. Untuk mendapatkan semua sel ke tahap pembahagian sel khusus ini, sel-sel tersebut diperlakukan dengan bahan kimia yang menghentikan pembelahan sel pada titik di mana kromosom adalah yang paling padat.

6. Membebaskan Kromosom Dari Selnya

Untuk melihat kromosom padat ini di bawah mikroskop, kromosom harus keluar dari sel darah putih. Ini dilakukan dengan merawat sel darah putih dengan larutan khas yang menyebabkannya pecah. Ini dilakukan semasa sel berada di slaid mikroskopik. Reruntuhan yang tersisa dari sel darah putih dihanyutkan, meninggalkan kromosom yang tersekat pada slaid.

7. Pewarnaan Kromosom

Kromosom secara semula jadi tidak berwarna. Untuk mengetahui satu kromosom dari yang lain, pewarna khas yang disebut pewarna Giemsa digunakan pada slaid. Pewarna Giemsa mengotorkan kawasan kromosom yang kaya dengan asas adenin (A) dan timin (T). Apabila diwarnai, kromosom kelihatan seperti tali dengan jalur cahaya dan gelap. Setiap kromosom mempunyai corak khas jalur cahaya dan gelap yang membolehkan ahli sitogenetik memberitahu satu kromosom dari yang lain. Setiap jalur gelap atau terang merangkumi beratus-ratus gen yang berbeza.

8. Analisis

Setelah kromosom diwarnai, slaid diletakkan di bawah mikroskop untuk dianalisis. Gambar kemudian diambil dari kromosom. Pada akhir analisis, jumlah kromosom akan ditentukan dan kromosom disusun mengikut ukuran.

9. Membilang Kromosom

Langkah pertama analisis adalah mengira kromosom. Sebilangan besar manusia mempunyai 46 kromosom. Orang dengan sindrom Down mempunyai 47 kromosom. Ada juga kemungkinan orang mempunyai kromosom yang hilang, lebih dari satu kromosom tambahan, atau sebahagian kromosom yang hilang atau diduplikasi. Dengan hanya melihat jumlah kromosom, adalah mungkin untuk mendiagnosis keadaan yang berbeza termasuk sindrom Down.

10. Menyusun Kromosom

Setelah menentukan bilangan kromosom, ahli sitogenetik akan mula menyusun kromosom. Untuk menyusun kromosom, ahli sitogenetik akan membandingkan panjang kromosom, penempatan sentromer (kawasan di mana dua kromatid bergabung), dan lokasi dan ukuran pita G. Pasangan kromosom bernombor dari terbesar (nombor 1) hingga terkecil (nombor 22). Terdapat 22 pasang kromosom, yang disebut autosom, yang sama persis. Terdapat juga kromosom seks, betina mempunyai dua kromosom X sementara lelaki mempunyai kromosom X dan Y.

11. Melihat Struktur

Selain melihat jumlah kromosom dan kromosom jantina, ahli sitogenetik juga akan melihat struktur kromosom tertentu untuk memastikan bahawa tidak ada bahan yang hilang atau tambahan serta kelainan struktur seperti translokasi. Translokasi berlaku apabila bahagian satu kromosom melekat pada kromosom yang lain. Dalam beberapa kes, dua kepingan kromosom ditukar (translokasi seimbang) dan lain-lain bahagian tambahan ditambahkan atau hilang dari satu kromosom sahaja.

12. Keputusan Akhir

Pada akhirnya, kariotip akhir menunjukkan jumlah kromosom, jantina, dan sebarang kelainan struktur dengan kromosom individu. Gambar digital kromosom dihasilkan dengan semua kromosom disusun mengikut nombor.

Had Ujian Karyotaip

Penting untuk diperhatikan bahawa walaupun ujian kariotip dapat memberikan banyak maklumat mengenai kromosom, ujian ini tidak dapat memberitahu anda sama ada terdapat mutasi gen tertentu, seperti yang menyebabkan fibrosis kistik. Kaunselor genetik anda dapat membantu anda memahami apa yang boleh diberitahu oleh ujian kariotip dan apa yang tidak dapat dilakukannya. Kajian lebih lanjut diperlukan untuk menilai kemungkinan peranan mutasi gen dalam penyakit atau keguguran.

Juga penting untuk diperhatikan bahawa kadang-kadang ujian kariotip mungkin tidak dapat mengesan beberapa kelainan kromosom, seperti ketika terdapat mosaik plasenta.

Pada masa sekarang, pengujian kariotip pada persekitaran pranatal cukup invasif, memerlukan pengambilan amniosentesis atau chorionic villus. Walau bagaimanapun, menilai DNA bebas sel dalam sampel darah ibu sekarang sudah biasa sebagai alternatif yang kurang invasif untuk diagnosis pranatal kelainan genetik pada janin.

Satu Perkataan Dari Sangat Baik

Sementara menunggu hasil kariotip anda, anda mungkin merasa sangat cemas, dan seminggu atau dua minggu yang diperlukan untuk mendapatkan hasil dapat terasa seperti ribuan tahun. Luangkan masa itu untuk bergantung pada rakan dan keluarga anda. Mempelajari beberapa keadaan yang berkaitan dengan kromosom yang tidak normal juga dapat membantu. Walaupun banyak keadaan yang didiagnosis dengan kariotip boleh mendatangkan malapetaka, ada banyak orang yang hidup dengan keadaan ini yang mempunyai kualiti hidup yang sangat baik.